EN
TÜRKÇE
Oral Presentation - 41
In vitro Evaluation of Bacterial Adhesion to Urethral Endothelium After Penile Tourniquet Application
Ö Boybeyi*, B Kaçmaz**, E Arat***, P Atasoy****, Ü Kısa*****, Y Dere Günal******, MK Aslan******, T Soyer*
*Hacettepe University Faculty of Medicine Department of Pediatric Surgery
**KIRIKKALE UNIVERSITY, MEDICAL FACULTY, DEPARTMENT OF CLINICAL MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASES, KIRIKKALE
***KIRIKKALE UNIVERSITY, SCIENCE FACULTY, DEPARTMENT OF BIOLOGY, KIRIKKALE
****Kirikkale University Faculty of Medicine Dept. of Pathology
*****Kirikkale University Faculty of Medicine Dept. of Biochemistry
******Kırıkkale University Faculty of Medicine Department of Pediatric Surgery
Aim: Penile tourniquet (PT) causes complication related to direct pressure effect beneath and distal to tourniquet. There is no enough data regarding PT effects on bacterial adhesion to urethral endothelium. We conducted an in vitro study to investigate effect of PT on bacterial adhesion to urethral endothelium.
Methods: Thirty-five rats were allocated into control group (CG, n=7), sham group (SG, n=14) and PT group (PTG, n=14). No intervention was done in CG. A 5 mm-length urethral repair was performed in SG and PTG. In PTG, 10min-duration PT was applied during procedure. Tissue oxygenation monitor (MoorVMS-OXY) was used to achieve same degree of ischemia in all subjects. SG and PTG were allocated into 2 subgroups according to time of tissue harvesting; 1 hour (SG-1, PTG-1) and 24 hour (SG-2, PTG-2). Harvested penile tissues were examined pathologically for wound healing and immunohistochemically for staining with e-selectin, ICAM-1 and eNOS antibodies. For in vitro assay, urethra was isolated and cultivated. After urethral cell proliferation was achieved, incubation with E.coli (106 bacteria/ml) was performed. Mean number of adhering bacteria per endothelial cell was counted and given as percentage.
Results: Pathologically, wound healing scores were higher in SG than CG and in PTG than CG and SG (p<0.05). The scores were significantly altered in samples with late harvesting time (p<0.05). Immunohistochemically, staining with all antibodies was significantly higher in PTG-2 compared to CG, SG and PTG-1 (p<0.05). In vitro urethral cell proliferation was only achieved in CG and SG. Bacterial adhesion percentages were 10%±7.8% in CG, 42%±9% in SG-1 and 85%±8.2% in SG-2 (p<0.05).
Conclusion: PT causes alteration in bacterial adhesion molecules immunohistochemically. PT inhibits urethral endothelium proliferation in adhesion assay. Preoperative antibiotics prophylaxis should be performed before PT application in order to make antibiotics to achieve to urethral cells before tissue ischemia develops.
Penil Turnike Uygulaması Sonrasında Üretra Endoteline Bakteri Adezyonunun in vitro Değerlendirilmesi
Ö Boybeyi*, B Kaçmaz**, E Arat***, P Atasoy****, Ü Kısa*****, Y Dere Günal******, MK Aslan******, T Soyer*
*Hacettepe Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Cerrahisi Anabilim Dalı
**Kırıkkale Üniversitesi Tıp Fakültesi, Klinik Mikrobiyoloji ve İnfeksiyon Hastalıkları AD, Kırıkkale
***Kırıkkale Üniversitesi Fen Fakültesi, Biyoloji Bölümü, Kırıkkale
****Kırıkkale Üniversitesi Tıp Fakültesi Patoloji AD
*****Kırıkkale Üniversitesi Tıp Fakültesi Biyokimya AD
******Kırıkkale Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Cerrahisi Anabilim Dalı
Amaç: Penil turnike (PT), turnikenin altında ve distalinde direk basınç etkisine bağlı komplikasyonlara neden olabilir. PT’nin üretra endoteline bakteri adezyonununa etkisi hakkında yeterli bilgi yoktur. Üretra endoteline bakteri adezyonunda PT’nin etkisini araştırmak amacıyla in vitro bir çalışma oluşturulmuştur.
Yöntem: Otuzbeş sıçan kontrol (KG, n=7), sham (SG, n=14) ve PT (PTG, n=14) gruplarına ayrılmıştır. KG’da herhangi bir işlem yapılmamıştır. SG ve PTG’da 5 mm uzunluğunda üretra kesisi ve onarımı yapılmıştır. PTG’da işlem sırasında 10 dk süreyle PT uygulanmıştır. Tüm deneklerde eşit iskemi oluşturmak için doku oksijenizasyon monitörü (MoorVMS-OXY) kullanılmıştır. Doku örnekleme zamanına göre SG ve PTG alt gruplara ayrılmıştır; 1.saat (SG-1, PTG-1) ve 24.saat (SG-2, PTG-2). Alınan örneklerde patolojik olarak yara iyileşmesi ve imünohistokimyasal olarak e-selectin, ICAM-1 ve eNOS antikor boyamaları değerlendirilmiştir. in vitro test için, üretra izole edilip kültüre alınmıştır. Üretra endotel proliferasyonu sonrasında, E.coli (106 bakteri/ml) ile inkübasyon yapılmıştır. Adezyon gösteren ortalama bakteri sayısının endotel hücresine oranı hesaplanmış ve sonuçlar yüzde değer olarak verilmiştir.
Bulgular: Patolojik olarak, yara iyileşmesi skoru SG’da KG’na göre ve PTG’da KG ve SG’na gore anlamlı derecede yüksektir (p<0.05). Doku örnekleme süresi artıkça bu skorlar artmıştır (p<0.05). İmünohistokimyasal olarak, tüm antikorlarla boyanmalar PTG-2’de KG, SG ve PTG-1’e gore anlamlı derecede artmıştır (p<0.05). in vitro hücre proliferasyonu KG ve SG’da elde edilebilmiştir. Bakteri adezyon oranları KG’da %10±7.8, SG-1’de %42±9 ve SG-2’de %85±8.2 dir (p<0.05).
Sonuç: PT imünohistokimyasal olarak bakteri adezyon moleküllerini etkilemektedir. PT adezyon besiyerinde üretra endotelinin çoğalmasına engel olmaktadır. Preoperatif antibiyotik profilaksisinin doku iskemisi oluşmadan üretra endoteline ulaşabilmesi için PT’den önce verilmesi önerilir.