EN
TÜRKÇE
Oral Presentation - 12
Proteomic Analyses of Ureteropelvic Junction Obstruction
U Görmüş*, M Kasap**, H Tuğtepe***, K Özel****, G Akpınar**, A Kanlı**
*Istanbul Bilim University, Faculty of Medicine, Department of Medical Biochemistry, Istanbul
**Kocaeli University, Faculty of Medicine, Department of Medical Biochemistry, Kocaeli
***Marmara University School of Medicine, Department of Pediatric Surgery, Division of Pediatric Urology, Istanbul
****Istanbul Bilim University, Faculty of Medicine, Department of Pediatric Surgery, Istanbul
Aim: Uretero-pelvic junction (UPJ) obstruction is the most common pediatric urinary tract obstruction but the etiology is not illuminated yet. In this study, we aimed to understand the differential protein ingredients of the obstructed region, distal part of the region and proximal part as well.
Materials and Methods: Twelve children < 2 years age (five girls, seven boys, average age 6.9 months) with an intrinsic UPJ obstruction confirmed during pyeloplasty were included. Obstruction was on the left in 8 and right in 4 patients. Average follow-up time was 16.4 months. The normally excised materials were divided into: the obstructed UPJ part, the distal normal ureteral part of the obstructed segment and the proximal part of the obstucted segment. All tissues were transferred in liquid nitrogen to the laboratory to be protected in a -80˚C fridge. After protein isolation from those tissues, two-dimentional electrophoresis, image analyses and protein identification was performed.
Results: Annexin A1 and Annexin A5 were increased in the distal part of the obstructed region. Vimentin, mitochondrial ATP synthase subunit beta, peroxiredoxin-2 were expressed more in the proximal region compared to the obstructed part. In the obstruction part, Carbonic Anhydrase 1 protein, heatshock protein beta-1, expression was increased compared to proximal part. Desmin, Aortic Smooth Muscle Actin Protein (ACTA2) and its related proteins, tropomyosin beta and alpha-1 chains were increased in the obstructed region compared to the distal region.
Conclusion: Further studies are needed to define the biological processes and the molecular mechanisms responsible for this pathology; by using our results, it will be possible to know which proteins to focus on for the immunohistochemical and/or western blot studies to iluminate the details of the reasons and/or outcomes of the UPJ obstruction.
Üreteropelvik Bileşke Darlıklarında Proteomik Analiz
U Görmüş*, M Kasap**, H Tuğtepe***, K Özel****, G Akpınar**, A Kanlı**
*Istanbul Bilim Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyokimya A.D., İstanbul
**Kocaeli Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyokimya A.D., Kocaeli
***Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Çocuk Cerrahisi AD, Çocuk Ürolojisi BD, İstanbul
****İstanbul Bilim Üniversitesi Tıp Fakültesi, Çocuk Cerrahisi A.D., Istanbul
Amaç: Etiolojisi hala açıklanamamakla birlikte, üretero-pelvik bileşke (UPB) obstrüksiyonu pediatrik üriner sistemin en sık görülen obstrüksiyonudur.
Bu çalışmada, obstrükte alanın, alanın distalinin ve proksimalinin differansiyel protein içeriğini belirlemekti.
Materyal ve Metod: Intrinsek obstrüksiyonu piyeloplasti sırasında teyit edilen 2 yaş altı 12 çocuk (beş kız, yedi erkek, ortalama yaş: 6.9 ay) çalışmaya dahil edildi. Obstrüksiyon 8 hastada solda 4 hastada sağda idi. Ortalama takip süresi 16.4 ay olarak hesaplandı. Eksize edilen materyal obstrüksiyon olan UPJ alanı, obstrükte olan alanın distalindeki ve proksimalindeki alanlar olarak üçe ayrıldı. Tüm dokular sıvı nitrojenle taşınarak -80˚C buzdolabında saklandı. Dokulardan protein izolasyonu sonrası, iki boyutlu elektroforez, görüntü analizi ve protein tanımlaması yapıldı.
Bulgular: Obstrüksiyon alanının distal kısmında Annexin A1 ve Annexin A5 artmış olarak bulundu. Obstrükte alana göre proximal alanda Vimentin, mitokondriyal ATP sentaz altünite beta, perokiredoksin-2 artmış bulundu. Obstrükte olan alanda, proksimal alana göre karbonik anhidraz 1 proteini, heatshock protein beta-1 artmış bulundu. Desmin, Aortik Yassı Kas Aktin Proteinin (ACTA2) ve ilişkili proteinler, tropomisin beta ve alpha-1 zincirleri distale göre obstrükte alanda armış bulundu.
Sonuç: Bu patolojiye sebep veren biyolojik süreçler ve moleküler mekanizmaların ortaya çıkması için ileri çalışmalara ihtiyaç olsa da, bu çalışmanın sonucunda bu patolojinin nedeni ve/veya sonucuyla ilgili immünohistokimyasal ve/veya western blot çalışmalarında hangi proteinlere odaklanması gerektiği ortaya konulmuştur.